Nastavite celic inkubator na 37 stopinj Celzija in prilagoditi sestavo plina do 1. odstotnim kisikom , 3 odstotka ogljikovega dioksida in 96 odstotkov dušika .
2
avtoklavu vse ne- sterilno opremo in materiale
3
Delo v laminarni za ohranjanje sterilnosti , pripravo končnega medija dodanaslednje gojitvenem mediju RPMI 1640 :
D- glukoze do končne koncentracije 20 mm.
Hypoxantine do končne koncentracije 0,2 mm .
HEPES do končne koncentracije 25 mm .
Gentamicin sulfate do končne koncentracije 25 mg /L. jezik
Albumax II do končne koncentracije 0,5 odstotka w /proti
4
distribuira celotno količino medija , dosežen v prejšnji korak v toliko bučk kulturo, ki so želeli in jih postavimo na stresalnik v inkubator .
5
Ko jemedij dosegla 37 stopinj Celzija , dodajte parazit parka.
6
Spremenite gojišče vsak dan , da parazite dobro najedli in živ.
7
Dodaj rdečih krvničk vsak drugi dan . Ti bodo okužene z novimi paraziti , ki se proizvedejo v kulturi . Če postanejo preveč za bučko , razdeli vsebino v dva ali več dodatnimi .