Pour svoje gojišče celic v večjo posodo in postavite čašo na mehanskim mešalcem . Mešalo meša mediju med prezračevanjem , ki ga toku dušika . Uporaba te metode omogočajopripravo velike količine medija za vzdrževanje bolj enotno sestavka .
2
nalepiti nalite cev na izhod rezervoarja dušika . Prhamo cev je sestavljena iz steklene epruvete s sintrani stekleni konico vgrajene v konca cevi . Odprti konec cevi pritrjena na dolžino plastične cevi povezan z rezervoarjem dušika zagotavlja tok dušika , ki prihaja iz sintrani stekleni konec cevi z več tokov drobnih plinskih mehurčkov .
3
postavimo sintrani stekleni konec nalite cevi v dno posode in vklopi v mešalnik . Nastavitev stopnje premešamo v mehanskim mešalom zagotovimo enakomerno mešanje medija .
4
Vklopi toku dušika kadi in jo pustimo, da se mehurček v medij . Dušik bo nasičena medija z dušikom , kot se ne raztopi . Vsaka tekočina ima končno topnost različnih plinov . Kotdušik raztopi v mediju , so druge raztopljene plini izgnani iz medija . Splakovanje odstranjuje pline , kot je kisik in ogljikov dioksid iz medija kulture .
5
Pustimotoku dušika mehurček vsaj 15 minut , da se nasiči medija , odvisno od hitrosti toka plina . Ko jeakcija čiščenja medija končano, odstranite sintrani stekleno cev iz čaše in prenos očiščen medija celične kulture v zaprti posodi in ga shranite v hladilniku . Zniža temperatura v hladilniku bo zmanjšalo stopnjo , na kateri plini se raztopi v medij med skladiščenjem.