Kako odpraviti težave Primer dimer

verižne reakcije s polimerazo , ali PCR , jetehnika v molekularni biologiji uporablja za pomnoževanje specifičnih regije DNA . PCR je odvisna od primerjev , ki so kratke verige DNK , ki so komplementarni in specifično za DNA zanimanja . Medtem ko primerji običajno veže na DNK ujemanje njihovo zaporedje , občasno bodo povezale in razširjajo med seboj , kar je povzročilo pojav , znan kot temeljni premaz dimer.Things boste potrebovali
PREDNAMAZ sekvence
Proste Prikaži več navodil

1

Preglejte vsebino GC (število G in C ) v vaši primerjem zaporedju . GC vez je močnejša od AT lepljenje zaradi dodatnega vodikove vezi med gvanin in citozin . Optimalno lepljenje je vsaj 50 odstotkov vsebine GC .
2

Preglejte temperaturo kaljenja vaše reakcije . Nizke žarjenje temperature , na splošno opredeljena kot 55 ° C ali manj , lahko povzroči nespecifično vezavo premaza , ki lahko povzroči oligonukleotidov dimere poleg pomnoževanja napačnih genomskih odsekov .
3

Zakonska -Preveri količino in koncentracijo primerji ste ga dodali na PCR. Presežek primerji , ki ponavadi presega 75 picomoles , lahko povzroči oligonukleotidov dimere , kot dobro.