v štiri čiste epruvete in merijo 100 ul etilacetata vprvi s svojim pipete . Dodamo 50 ul z drugo, 25 zatretje in 5 načetrto mesto.
2
Spremenite konice pipet in dodamo deionizirano vodo do vsake epruvete . Za prvo cev dodamo 1,8 ml, nato 1,9 ml do druge cevi , 1,95 ml do tretje cevi in 1,6 ml načetrti . Premešamo s pipeto bi pomešali , se prepričajte , da spremenite merilno kapalko, nasvetov med cevmi .
3
Prenesemo 1 ml te zmesi v vsaki cevi za štiri čiste kivete . Again, se prepričajte, da spremenite merilno kapalko, nasvetov med cevmi .
4
Vstaviteprvi od štirih kivete v ugasniti , umerjeno spektrometra in ukrepa absorpcija pri 215 nm . Če niste prepričani , kako spremeniti valovno dolžino in /ali prazno svojo spektrofotometer , se posvetujte z navodili proizvajalca; Postopek se lahko , odvisno od naprave nekoliko razlikujejo . Zapišite si vrednost, ki jo izmeriti in meritve za vsebino preostalih treh kivete .
5
Bodite čisto lij ločnik in se prepričajtepetelinček ali možganov na koncu zaprta . Odstranite zamašek na vrhu .
6
Dodajte 2 ml etilacetata , ki ji sledi 15 ml vode in 15 ml izooctanol . Če je potrebno , se lahko podpre svoj lij ločnik s prstanom na obroču stojijo , medtem ko to stori .
7
Odstranite stekleni lij in ponovno zamašimo . Držite lij ločnik z obema rokama z eno roko pozicionirana nad zamaškom se prepričajte, da ne pride ven . Stresajte lij in nazaj nekajkrat . Nato pa jo nagnite nazaj in odprite zaporni ventil za razbremenitev tlaka . Postopek ponavljajte, dokler ne boste pretresla vsebin za skupaj 30 sekund ali tako. Poskrbite, da boste vedno stresa enkrat ali dvakrat , nato pa razbremeni pritisk. Če dovolite pritisk za izgradnjo notri , bi to lahko povzročilozamašek , da pridejo ven in spustite vse vsebine na tvojem klopi .
8.
Postavite lij ločnik na obroč pritrjen na stojalo obroča . Pustimo, da se vsebina ločiti na dve plasti . Zgornji sloj je oktanol; nižji sloj vode . Zberemo vodne faze in izmerimo njene vpojnosti v UV delu spektra .
9
bučkomajhen ( 25 ml ~) pod lij ločnik in odteče nekaj ml vodne plasti na bučke . Odstranite 1 ml vsebini bučke s svojim mikropipeto in ga prenesemo v čisto kiveto .
10
Vstavite kivete v spektrofotometru in izmerite absorbanco pri 215 nm .
11
Vzemite svoje podatke absorbance in ga vnesite v program za delo s preglednicami , kot je Open Office ali Excel . Za štiri vzorce etil acetata pripravljeni na začetku , vstop molarnost v enem stolpcu in vpojnost sosednji koloni . Molarnost pri štirih vzorcih je, kot sledi : 100 mikroliterskega vzorec : 0,5091 molarno; 50 mikroliter vzorec: 0,2545 molarno; 25 mikroliter vzorec: 0,1273 molarno; in 5 mikroliter vzorec: . 0,02545 molsko
12
Uporabite svoj program za preglednice pripraviti raztreseni parcelo graf teh štirih podatkovnih točk z molarities ali koncentracijah na x - osi in vpojnosti na y. Če niste prepričani, kako to storiti , poglejte v navodilih za uporabo ali meni pomoč za program za obdelavo preglednic . Uporaba programa za preglednice , fit linearno enačbo ali linijo najboljšega prileganja obliki y = mx + b do teh podatkov. X - spremenljivko v tej enačbi jekoncentracija , medtem koy- spremenljivka jevpojnost .
13
Bodite vpojnost vašem 2 ml etilnega acetata vzorcu iz lij ločnik in jo delite s m -vrednost iz enačbe program za obdelavo preglednic , izračunano in odštejte b- vrednost. Čem - vrednost 1,2 , na primer , inb - vrednost 0,2 , medtem kovpojnost je 0,42 , 0,2 odštejemo od 0,42 in razdeliti rezultat z 0,5 , da dobimo koncentracijo 0,183 molov na liter .
14
Pomnožite svojo vrednost koncentracije z 0,015 litra , saj ste imeli 10 ml vode v lij ločnik . Če je bila vaša koncentracija 0,183 , na primer , bi lahko pomnožimo z 0,015 , da dobimo 2,745 x 10 ^ -3 mol etilacetata prisotne .
15
odštejemo rezultat od 14. Korak od 0,02036 molov ocetestra , kar je vrednost, ki jo prvotno dodali . Če ste imeli 2.745 x 10 ^ -3 mol v plasti vode , na primer, odštejte to število od 0,02036 moli za pridobitev 0,01762 mol prisotne v razpad plasti .
16
razdelite znesek, ki je prisotna v oktanol plast z zneskom prisoten v sloju vode , in to daje porazdelitveni koeficient svojo tekočine . Ta primer uporablja etilacetat , lahko pa uporabite tudi druge tekočine , dokler se koncentracije in vrednosti za molarnost ustrezno .