Kako zmanjšati nespecifična vezava z zabojniki

je sposobnost vezave v posodi ali v mikroploščnem jamic v imunološki preizkus, višji od zneska proteina vnosu v vsebnik ali vrtin . Za zmanjšanje ali preprečevanje protiteles ali drugih vrst proteinov in molekul absorbirala na posodo ali vrtin , morapreizkusom izperemo z ustreznim pufrom in posebnega zapornega reagenta je treba dodati . Tip pasu inizbrani blokira reagent je odvisna od vrste eksperimentalnih assay.Things boste potrebovali
Plate vodnjake
Buffer solution
Blokiranje reagent
Odpipetirajte
antigen
Antibody

Pokaži MoreInstructions Neomejeno
1

Coat vodnjakov plošča z antigenom . Uporabite razredčitev antigena . Ker le okoli 3 odstotke proteina v vzorcu jetarčni protein niso potrebni čiste raztopine antigena . Ko razredčevanje , zagotoviti, da se vzorci vsebujejo antigen v koncentraciji , ki je v območju detekcije protiteles . Odpipetiramo rešitev za redčenje antigen navzdol vodnjakov tablice . Nekatere plošče se lahko predhodno prevlečene z antigenom . Preberite navodila , ki so priložena vdolbinic plošč .
2

pokrije plošče z lepilom plastiko in pustimo čez noč . Plošče speremo s pufri , kot so Tris - pufrom ali - fosfatnim pufrom . Za pranje, izpiranje plošče s pomočjo pritiska plastenko , napolnjeno z raztopino pufra nad laboratorijski pomivalno korito . Pat plošče s papirnato brisačo , da odstranite morebitne preostale kapljice puferske raztopine .
3

Zmanjšajtenespecifično vezavo proteinov in molekul , ki uporabljajo pufru za blokiranje ali reagenta , kot detergent oken , suho mleko ali govejega seruma . Vrsta blokiranje reagent bo odvisna testu . Dodaj zaporno reagenta vdolbinice z uporabo pipete . Ponovno kritje ploščo z lepilnim plastike in pustimo čez noč .
4

znova Re - Vdolbinice speremo tablice uporabo blažilne raztopine . Ti koraki se zmanjša količina nespecifične vezave , ki se lahko pojavi v vdolbinice plošče pred dodajanjem potrebno raztopino protitelesa za postopek . Poleg tega lahko blokira reagenti pomaga zmanjšati barve ozadja v rezultatih testov .